| 摘要: |
| 为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂’组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果。结果表明：不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等杂质,传统CTAB法提取RNA存在DNA污染。针对百合叶片组织富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用醋酸钠及无水乙醇去除多糖,酚/氯仿反复抽提去除蛋白,DNaseⅠ去除DNA,LiCl有效沉淀RNA。采用此方法提取的RNA条带清晰,经紫外光谱分析D260/D280比值为2.0,D260/D230为2.1,电泳28S、18S条带清晰,比值约为1.5。RT-PCR结果表明,改进的CTAB法提取的总RNA可直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验。 |
| 关键词: 百合 叶片 RNA提取 CTAB改进法 多糖 RT-PCR 百合 提取 方法 比较 优化 lily leaves extraction improvement 生物学实验 分子克隆 表达分析 基因 电泳 比值 紫外光谱分析 沉淀 LiCl 除蛋白 抽提 |
| DOI：10.11841/j.issn.1007-4333.2008.04.075 |
|
| 基金项目:北京市科委科研项目 |
|
| Analysis and improvement of high-quality RNA extraction in leaves of lily |
|
|
|
| Abstract: |
|
| Key words: |
