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| 叠朊（Dpl）是朊蛋白（PrP）的横向同源物，两者的功能密切相关。本研究旨在制备能够特异检测重组表达的或者动物组织中Dpl的抗血清，以用于研究Dpl的功能及其与PrP的关系。根据已克隆的汉族人、中国黄牛、甘肃土种羊的Dpl基因，将其Dpl成熟蛋白编码区分别定向克隆到表达载体pET-30a（4-）上，将重组表达载体转入E.coli BL21（DE3）pLys S，IPTG诱导表达。将表达并纯化的牛重组Dpl免疫4只青紫蓝兔，制备牛Dpl的抗血清，SDS—PAGE分析表明人、牛和羊的重组Dpl在E．coli中获得了高效表达。用Ni—NTA树脂亲和层析和胶洗脱法纯化了上述表达产物，ELISA和West—blot分析表明，制备的牛Dpl抗血清与重组人、牛和羊的Dpl以及牛和羊睾丸组织的Dpl发生了特异性反应，却不与重组人、牛和羊的PrP发生反应。上述结果表明制备的Dpl抗血清可以作为人、牛和羊Dpl的检测试剂和研究材料。 |
| 关键词: 传染性海绵状脑病 叠朊 朊蛋白 基因表达 抗血清 基因 高效表达 叠朊蛋白 抗血清 Expression human gene bovine preparation sheep 研究材料 检测试剂 结果 特异性反应 发生 睾丸组织 重组人 ELISA 洗脱法 亲和层析 |
| DOI：10.11841/j.issn.1007-4333.2008.03.048 |
| 修订日期：2007-12-05 |
| 基金项目:国家自然科学基金
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甘肃省科技攻关项目
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甘肃省自然科学基金
,
中国博士后科学基金 |
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| Expression of doppel(Dpl)gene in human,cattle and sheep and preparation of bovine Dpl antisera |
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