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用原生质体融合法获得稻恶苗菌异核体
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摘要:
用紫外线照射稻恶苗菌(Glbberella fujikuroi)野生型分生孢子9~12 min,存活率为0.6%~23%,得到单标记营养缺陷型突变菌株5株。选出1144(ade-)、1184(arg-)和1175(try-)3株,用亚硝基胍诱变处理,得到双重标记的营养缺陷型突变菌8株。将11442(ade-,pba-)和11844(arg-,try-)两菌株用原生质体融合技术使它们形成异核体。用2%蜗牛酶加2%纤维素酶以0.6mol/L NaCl 液作渗透压稳定剂制成混合酶液,裂解幼嫩菌丝1.5~3 h,获得2×10'个/g 菌丝的原生质体。经35%PEG 融合剂将等量原生质体融合,获得异核菌落230个。经过进行排除营养互养的实验;对4株异核体菌株进行子代分离的遗传学分析;发现其两种核型的比例在1:1.4~1:8.5之间;对4株异核体还进行酯酶同功酶的测定。证明这4株菌株是异核体。
关键词:  稻恶苗菌  营养缺陷型  原生质体融合  酯酶同工酶  
DOI:
基金项目:国家自然科学基金项目之一
HETEROKARYON FORMATION BY PROTOPLAST FUSION OF AUXOTROPH IN GIBBERELLA FUJIKUROI
Abstract:
Key words:  Gibberella fujikuroi  auxotroph  protoplast fusion  isozyme